本文標題:" 蛋白質(zhì)膠體電泳分析原理-實(shí)驗室顯微鏡專(zhuān)業(yè)廠(chǎng)家"
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蛋白質(zhì)膠體電泳分析原理-實(shí)驗室顯微鏡專(zhuān)業(yè)廠(chǎng)家
蛋白質(zhì)膠體電泳分析(sodium dodecyl sulfate polyacrylamde gel
electrophoresis, SDS-PAGE)
SDS-PAGE 是最普遍的蛋白質(zhì)電泳方式。SDS 是介面活性劑,可使蛋白質(zhì)
變性,并在分子表面均勻佈上一層負電荷。因此在 SDS-PAGE 系統中,樣本
分子的泳動(dòng)率,僅取決于其分子量,與原來(lái)分子所帶的電荷無(wú)關(guān)
原理
帶電分子在電場(chǎng)中會(huì )被電流移動(dòng),是為電泳;其泳電的大小程度稱(chēng)為泳動(dòng)率(mobility)。
泳動(dòng)率與分子上電密度成正比,而與分子摩擦力成反比。摩擦力決定于此分子之大小、形狀。分子量大者摩擦力大,泳動(dòng)率??;球形
分子摩擦力較小,則泳動(dòng)率大。而蛋白質(zhì)分子上的淨電荷,取決于環(huán)境 pH高低;若環(huán)境 pH 高于蛋白質(zhì)的 PI,
此則蛋白質(zhì)帶淨負電,反之帶淨正電若剛好等于其 PI,淨電荷為零(同一分子在不同 pH 環(huán)境下,可能帶不同淨
電荷)。在電泳系統中,電子由負極流向正極;帶負電的分子往正極跑,帶
正電的分子往負極跑,而帶電者則不易泳動(dòng)。而大部分電泳系統的 pH 定在
8.3,在此 pH 下,凡是 PI 小于 8.3 的分子均帶負電荷,可以往正極跑
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